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文章类型:
单位:
[1]华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科
华中科技大学同济医学院附属同济医院
外科学系
骨科
出处:
ISSN:
关键词:
干细胞
转化生长因子β
细胞外基质
软骨细胞
软骨形成
摘要:
目的探讨TGF-β诱导前软骨干细胞(precartilaginous stem cells,PSCs)成软骨分化的可行性及软骨细胞外基质的表达机制。方法采用藻酸盐凝胶三维培养分别以TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3诱导PSCs向成软骨方向分化,应用免疫组化、RT-PCR、免疫沉淀、Westernblot和分光光度等技术测定分化过程中特异性软骨基质成分的表达。结果 TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3在培养7,14,21 d均有Ⅱ型胶原表达,TGF-β3组Ⅱ型胶原表达较强;TGF-β3诱导21 d的PSCs免疫组化检测可见细胞及周围均有可聚蛋白聚糖、纤调蛋白、软骨寡聚基质蛋白表达;TGF-β3组RT-PCR检测显示在8 d内开始出现可聚蛋白聚糖、纤调蛋白、Ⅰ型胶原、Ⅹ型胶原、软骨寡聚基质蛋白等的表达,8 d后开始出现Ⅱ型胶原表达。免疫沉淀及Western blot检测显示TGF-β3组7,14,21 d分别有软骨寡聚基质蛋白及Ⅹ型胶原表达。分光光度检测显示TGF-β1组在14或21 d时氨基多糖含量及氨基多糖/DNA比率均低于TGF-β2组或TGF-β3组(P(0.01)。结论 TGF-β能诱导PSGs向成软骨方向分化,此分化过程伴随特异性软骨细胞外基质成分的沉淀。可以通过分析关键性软骨基质成分的表达了解PSCs所处的分化阶段。
第一作者:
第一作者单位:
[1]华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科
推荐引用方式(GB/T 7714):
游洪波,陈安民,王国宾,等.转化生长因子-β诱导前软骨干细胞成软骨分化的研究[J].中华创伤杂志.2010,26(5):453-459.