目的探讨PI3K/Akt/GSK-3β通路对人肾小管上皮细胞（HK-2）缺血再灌注损伤过程中细胞凋亡的调控及重组人红细胞生成素（rHuEPO）的预保护作用。方法正常培养的HK-2细胞,分为7组,正常对照组、缺血再灌注（I/R）组、LY294002干预组（PI3K/Akt阻断剂10μmol/L）、LiCl干预组（GSK-3β阻断剂20μmol/L）、rHuEPO干预组（20U/L）、rHuEPO+LY294002双干预组、rHuEPO+LiCl双干预组。Western blot法检测蛋白激酶B（Akt）、AktSer473、糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）、GSK-3βSer9及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase）3活性;MTT法检测细胞活力;An-nexinⅤ/PI染色结合流式细胞仪技术检测细胞凋亡。结果缺血再灌注损伤诱导HK-2细胞凋亡率上调[（15.2±1.4）%]、Akt活性水平下降、GSK-3β及Caspase3酶活性水平上调,与正常对照组相比,差异均有统计学意义（均P(0.05）。与I/R组相比,LY294002干预使细胞凋亡率进一步上调[（18.2±2.1）%]、Akt活性水平下调、GSK-3β及Caspase3酶活性上调;LiCl干预使细胞凋亡率下调[（12.3±0.8）%]、Akt活性水平上调、GSK-3β及Caspase3酶活性下调,差异均有统计学意义（均P(0.05）。rHuEPO干预与I/R组相比,细胞凋亡率下降[（11.1±1.6）%]、Akt活性水平升高而GSK-3β及Caspase3酶活性下调,差异均有统计学意义（均P(0.05）。与rHuEPO干预组比较,rHuEPO+LY294002双干预组细胞凋亡率升高[（13.4±1.9）%]、Akt活性水平下降而GSK-3β及Caspase3酶活性上调;rHuEPO+LiCl双干预组细胞凋亡率下调[（7.5±1.3）%]、Akt活性水平上升而GSK-3β及Caspase3酶活性下降,差异均有统计学意义（均P(0.05）。结论缺血再灌注损伤可引起肾小管上皮细胞凋亡,Akt活性降低及GSK-3β活性升高,影响Caspase3依赖的外源性凋亡途径可能是其凋亡机制之一。rHuEPO可通过增强Akt活性,降低GSK-3β及Caspase3酶活性,减少细胞凋亡,对HK-2缺血再灌注损伤有一定的保护作用。