目的初步研究siHybrids技术对铜绿假单胞菌野生菌PAO1外排泵mexB基因体外沉默效应。方法针对铜绿假单胞菌野生株PAO1外排泵mexB基因设计并合成3条特异性siHybrids分子和1条阴性对照siHybrids分子。在分子浓度为50 nmol/L下,分别以合成的siHybrids分子干扰铜绿假单胞菌野生菌PAO1,并设实验组为铜绿假单胞菌野生菌PAO1空白对照组,阴性对照组scamble（sc）-001,干预组siHybrids（si）-001、siHybrids（si）-002及siHybrids（si）-003,分别在干预12 h及24 h后采用real-time PCR法检测各实验组中靶基因mexB基因mRNA的表达水平。进一步采用Mueller-Hinton倍比稀释法检测50 nmol/L浓度下,siHybrids分子干预铜绿假单胞菌野生菌PAO1前后氯霉素（CP）、红霉素（EM）、左氧氟沙星（L-OFLX）、头孢他啶（CAZ）、美洛培南（MER）的最小抑菌浓度（MIC）值。结果不同siHybrids分子干预PAO1 12 h后,mexB基因mRNA表达量无明显差异性;但干预24 h后,mexB基因mRNA表达量:干预组（si-001,si-002,si-003）比空白对照组、阴性对照组（sc-001）有明显下降。对比干预12 h、24 h后mexB基因mRNA表达量,可以发现空白对照组、阴性对照组（sc-001）mRNA的表达量成上升趋势,而干预组（si-001,si-002,si-003）mexB基因mRNA表达量均呈下降趋势。siHybrids分子在干预铜绿假单胞菌野生菌24 h前后的氯霉素（CP）、红霉素（EM）、左氧氟沙星（L-OFLX）、头孢他啶（CAZ）、美洛培南（MER）MIC无明显差异性。结论在mRNA表达水平上,siHybrids分子能体外干预铜绿假单胞菌PAO1 mexB基因mRNA表达,此种沉默作用呈现时间依赖性,且在24 h能有效地发挥干预作用。