摘要:
目的探讨低强度脉冲超声波(LIPUS)对体外分离培养的大鼠脂肪源干细胞(ADSCs)增殖及成骨分化的影响。方法取4周龄Sprague-Dawley大鼠腹股沟处脂肪组织,分离出脂肪干细胞并体外培养,经免疫磁珠分选、流式细胞仪鉴定ADSCs表面标志后,取第3代ADSCs,经LIPUS作用不同时间后,采用流式细胞仪检测细胞周期,计算细胞增殖指数,采用CCK-8法比较细胞增殖活性。取第3代ADSCs,设置阴性对照组、LIPUS组、成骨诱导组及L1PUS联合成骨诱导组,于LIPUS作用7 d、14 d时测定各组细胞碱性磷酸酶(ALP)活性;于LIPUS作用21 d时采用Von kossa染色比较各组细胞成骨分化能力。结果第3代ADSCs高表达CD29、CD44,低表达CD34,符合ADSCs表面标志物特征;LIPUS组细胞增殖指数较对照组明显提高,细胞增殖加快。与阴性对照组比较,LIPUS组于实验进行7d、14d后ALP活性明显升高;LIPUS作用能促进ADSCs致矿化结节形成,但其矿化结节数量不及LIPUS联合成骨诱导组。结论 LIPUS能加速ADSCs增殖,促进ADSCs向成骨细胞分化。