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柯萨奇-腺病毒受体不同胞内功能域缺失突变载体的构建与表达

Construction and expression of different intracellular functional-domain deleted recombinant vector of coxsackie-adenovirus receptor

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文献详情

资源类型：

收录情况： ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-E

作者：
范良生[1] * ; 王鸿雁[1] ; 王蓓蓓[1] ; 陈刚[1] ;
单位： [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤生物医学中心
出处：
DOI： 10.3969/j.issn.1001-9448.2011.15.003
ISSN：

关键词： 柯萨奇-腺病毒受体 功能域缺失突变重组体 卵巢癌

摘要：
目的以柯萨奇-腺病毒受体（Coxsackie and adenovirus receptor,CAR）蛋白结构的功能解析作为切入点,构建不同CAR胞内域缺失突变的表达载体。方法利用定点缺失突变策略构建CAR胞内域PKC、CK2、TYR磷酸化位点的缺失突变体及胞内域完全缺失的突变体。利用三步PCR法扩增获得相关的基因片段后,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1/V5/His,通过双酶切及测序进行鉴定后,分别转染至低表达CAR的人卵巢癌细胞系SKOV3细胞中,并用Werstern blot检测细胞转染后CAR的表达水平。结果所有突变体经过测序分析均证实序列与设想的突变序列相符,各突变体在SKOV3细胞中获得了满意的表达。结论成功构建不同CAR胞内功能域缺失突变表达载体,为后续研究CAR及其胞内不同功能域在卵巢癌中的作用机制提供了研究基础。

基金：
国家自然科学基金资助项目(30700895;30672227;30770913)%科技部"973"计划资助项目(2009CB521808)

基金编号： 30700895;30672227;30770913

语种：
中文
第一作者：
第一作者单位： [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤生物医学中心
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
范良生,王鸿雁,王蓓蓓,等.柯萨奇-腺病毒受体不同胞内功能域缺失突变载体的构建与表达[J].广东医学.2011,32(15):1945-1949.

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