目的构建pGC-FU-survivin慢病毒质粒,旨在下一步实验中利用survivin蛋白的表达影响原代肝细胞的增殖。方法从高表达survivin的小鼠淋巴瘤细胞株YAC-I中获取存活素（survivin）基因,连接到pcDNA3.1（+）质粒上,双酶切及双向测序鉴定。构建pGC-FU-survivin慢病毒载体,从基因水平和蛋白质水平鉴定含有survivin的目的片段表达。经包装、纯化,获得效价较高的病毒颗粒进行下一步生物学功能研究。结果双酶切及测序证实从YAC-I中获得的survivin基因连接到pcDNA3.1（+）质粒上,除第317位碱基由腺苷酸突变为胸腺嘧啶外,其余均与NCBI基因文库中survivin基因切合,该突变不影响蛋白质空间结构及蛋白质生理功能。构建pGC-FU-survivin表达质粒的阳性克隆菌株转染293T细胞后,荧光显微镜下观察可见绿色荧光,Western blot结果见一与标准品大小相同的条带。在293T细胞中进行病毒包装,最终纯化出pGC-FU-survivin慢病毒颗粒。结论借助T载体及pcDNA3.1（+）质粒,成功地在pGC-FU慢病毒表达质粒上建立了pGC-FU-survivin慢病毒表达质粒。