目的通过微球体培养富集胰腺癌干细胞,检测其表皮生长因子受体（EGFR）和去整合素-金属蛋白酶9（ADAM9）的表达,并探讨其意义。方法运用无血清条件培养基悬浮培养胰腺癌PANC1细胞,并连续传代培养。将部分微球体接种于含血清及胶原底物的培养基中进行分化诱导。收集微球体细胞及分化细胞,流式细胞仪检测侧群（SP）细胞比例;实时PCR及蛋白质印迹法检测细胞EGFR、ADAM9 mRNA和蛋白的表达。结果成功培养出胰腺癌PANC1细胞微球体,并能在体外连续传代。微球体细胞分化诱导后能重新贴壁生长。微球体细胞和分化细胞中SP细胞比例分别为（5.40±0.38）%和（2.80±0.42）%,两者差异具有统计学意义（P(0.05）。微球体细胞与分化细胞相比,EGFR及ADAM9 mRNA表达分别上调约2.5和3.0倍（P(0.05）;微球体细胞EGFR及ADAM9蛋白相对表达量分别为0.90±0.09和0.64±0.07,显著高于分化细胞的0.62±0.11和0.48±0.09（P(0.05）。结论微球体培养能富集胰腺癌干细胞,ADAM9可能通过EGFR信号通路在胰腺癌的发生、发展中起重要作用。