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◇ 统计源期刊
文章类型：
单位：
[1]同济大学附属同济医院骨科,上海,200065
[2]上海市第八人民医院妇产科,上海,200235
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ISSN：
关键词：
可诱导慢病毒shRNA栽体
TGIF
TGF-β信号通路
Tet-on系统
摘要：
目的 构建针对同源域蛋白TGIF(5′-TG-3′interacting factor)可诱导表达shRNA的慢病毒载体,鉴定其在大肠癌细胞系DLD1中对TGIF的基因沉默效率,进一步研究其对TGF-β信号通路下游基因的影响.方法 设计并合成针对TGIF的RNA干扰序列,克隆到可被强力霉素诱导的新型Tet-on慢病毒载体,将慢病毒颗粒感染大肠癌细胞系DLD1细胞.培养并分离细胞克隆后,使用强力霉素(doxcycline)进行诱导,用Real-Time PCR和Western印迹法检测TGIF和PAI-1的表达情况.结果 构建了针对TGIF可诱导shRNA的真核表达病毒载体并获得相应的病毒,病毒可以高效感染大肠癌细胞系DLD1.在强力霉素诱导下,TGIF在DLD1细胞系的表达得到有效抑制,TGF-β下游基因PAI-1和p15表达明显升高.结论本研究成功构建了可诱导表达shRNA慢病毒载体,其在强力霉素诱导下可以有效抑制TGIF在大肠癌细胞系内的表达；TGIF可以抑制TGF-β信号传导通路.
第一作者：
第一作者单位：
[1]同济大学附属同济医院骨科,上海,200065
推荐引用方式(GB/T 7714)：
张明珠,王丹,赵有光,等.新型shRNA慢病毒载体抑制TGIF表达及对TGF-β通路的调节[J].同济大学学报（医学版）.2011,32(4):1-4.
