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抗人神经肽Y单克隆抗体的制备及鉴定

Preparation and Identification of Monoclonal Antibody Against Human Neuropeptide Y

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资源类型:
单位: [1]南方医科大学(原第一军医大学),广州,510515,中国 [2]大连市董萍医疗美容整形医院,大连,116011,中国 [3]京天成生物技术(北京)有限公司,北京,100085,中国 [4]华中科技大学同济医学院同济医院,武汉,430030,中国 [5]南方医科大学公共卫生学院及热带医学学院,广州,510515,中国
出处:
ISSN:

关键词: 人神经肽Y 多肽合成 BALB/c小鼠 单克隆抗体 制备 鉴定

摘要:
目的:建立抗人神经肽Y(NPY)的单克隆抗体细胞株,方法:用合成的hNPY多肽偶联KLH免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,用ELISA法筛选出阳性克隆,经克隆化后建立抗人NPY杂交瘤细胞株,并对得到的单抗进行亚类、效价、纯度、亲和常数以及结合位点的测定和分析,结果:获得了3株稳定分泌抗hNPY单抗杂交瘤细胞株,IgG亚类鉴定分别为IgG3、IgG26、IgGI,腹水效价为1:20万~1.200万,纯化抗体效价为0.05 μg/ml~0.0005μg/ml,4A8抗体纯度达到95%以上,抗体亲和常数分别为5.27 x 106 L/mol,3.39 x 106 L/mol,1.05 x 107 L/mol,不同单抗配对经时间分辨免疫荧光法检测结果提示3株单抗是针对不同抗原决定簇,结论:成功制备了3株抗hNPY单抗,为研究NPY及其抗体在脂肪移植及肥胖治疗中的机制和应用奠定基础.

语种:
第一作者:
第一作者单位: [1]南方医科大学(原第一军医大学),广州,510515,中国 [5]南方医科大学公共卫生学院及热带医学学院,广州,510515,中国
推荐引用方式(GB/T 7714):

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