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富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白2基因全长及胞外段慢病毒表达载体的构建及对胶质瘤细胞增殖的影响

Construction of lentiviral vectors over-expressing full length and ectodomain of leucine-rich repeats and immunoglobulin-like domains-2 and the effects on the proliferation of glioma cells

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C ◇ 中华系列

单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院神经外科
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ISSN:

关键词: 富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白2 慢病毒 胶质瘤 细胞增殖

摘要:
目的构建富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白2(LRIG2)基因全长及胞外段的慢病毒表达载体并转染人胶质瘤细胞株,观察其对胶质瘤细胞增殖的影响。方法运用基因重组技术将LRIG2基因全长(LRIG2)和胞外段(LRIG2ecto)片段分别插入慢病毒载体pLVX-Puro-3×Flag;然后用pLVX-Puro-3×Flag-LRIG2和pLVX-Puro-3×Flag-LRIG2ecto分别转染胶质瘤细胞株U87;荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western blot分别检测LRIG2及LRIG2ecto的mRNA和蛋白表达;细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)检测转染后细胞的增殖;流式细胞术检测细胞周期。结果 Western blot鉴定Flag标签蛋白表达成功;LRIG2及LRIG2ecto过表达组mRNA表达分别是对照组的8.42和29.58倍(P(0.01);LRIG2及LRIG2ecto过表达组细胞增殖率明显高于对照组;LRIG2及LRIG2ecto过表达组细胞增殖指数(PI)分别为(50.63±1.29)%和(48.61±0.55)%,明显高于对照组(45.48±0.72)%(P(0.01)。结论成功建立稳定表达外源性LRIG2基因全长及胞外段的人胶质瘤细胞株,且证实均促进胶质瘤细胞增殖。

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第一作者:
第一作者单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院神经外科
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