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SP-B中间产物特异性抗体的制备与鉴定

Preparation and Characterization of Polyclonal Antibodies against the Surfactant Protein B Intermediates

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收录情况: ◇ 统计源期刊

单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科 [2]广州军区武汉总医院儿科
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关键词: 多克隆抗体 表面活性物质蛋白B 中间产物 制备与鉴定

摘要:
目的制备和鉴定表面活性物质蛋白B(surfactant protein B,SP-B)加工处理过程中部分中间产物的特异性抗体。方法利用Lasergene 7.0和Macvector 11.0.4软件进行抗原表位分析,确定作为抗原的3条多肽序列,将人工合成的多肽与钥孔戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联,免疫兔制备抗血清,间接酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测免疫前血清背景和免疫后血清效价,抗原亲和纯化抗血清,超滤浓缩抗体,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测抗体纯度,间接ELISA法检测抗体效价,蛋白质印迹(Western blot)鉴定抗体特异性。结果免疫前兔血清背景均低,免疫后抗血清效价均达到要求,抗原亲和纯化后所得抗体纯度及效价高,特异性好。结论成功制备了3种SP-B中间产物特异性多克隆抗体,为深入研究SP-B的加工处理奠定了基础。

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第一作者:
第一作者单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科 [2]广州军区武汉总医院儿科
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