摘要:
目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)体外定向诱导前软骨干细胞(PSCs)向成骨细胞分化的作用及其机制。方法将分离培养的大鼠乳鼠PSCs分别置于含有不同浓度(包括0,1×10-8mol/L,1×10-9mol/L,1×10-10mol/L)CGRP的DMEM/F12培养液中培养,观察细胞形态学变化。于细胞培养后不同时间点采用CCK-8检测细胞增殖情况;再将细胞随机分为实验组及对照组,实验组置于含有CGRP(1×10-9mol/L)的成骨培养基中培养,对照组则置于不含CGRP的成骨培养基中培养。对各组细胞进行茜素红染色并检测碱性磷酸酶(ALP)含量;采用RT-PCR法检测各组细胞成骨相关基因[如Runt相关基因转录因子2(RUNX2)、骨桥蛋白(OPN)及骨钙蛋白(BGP)等]表达;采用Western blot法检测β-catenin蛋白表达以评估CGRP对Wnt/β-catenin通路激活的影响。结果与对照组(其培养基中无CGRP)比较,CGRP在体外能显著促进PSCs细胞ALP含量增加,矿化结节增大、增多,显著上调RUNX2、0PN、BGP等成骨相关基因及蛋白β-catenin表达,但对PSCs增殖无明显影响。结论 CGRP可能通过激活Wnt/β-catenin通路促进PSCs向成骨细胞方向分化。