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siRNA抑制骨肉瘤U2OS细胞系中SIRT6的表达及其生物学作用研究

Influence of down-regulation of SIRT6 expression by small interfering RNA on U2OS osteosarcoma cell line

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C

单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科 [2]华中科技大学同济医学院附属协和医院干细胞研究与应用中心 [3]华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科
出处:
ISSN:

关键词: SIRT6 骨肉瘤 siRNA

摘要:
背景与目的:sirtuin6(SIRT6)蛋白是对人体细胞生长、代谢调控及应激反应等具有重要作用的一种核蛋白,常在细胞核中发挥多种调控作用。但该蛋白在骨肉瘤中的作用还不清楚,本研究通过下调人骨肉瘤U2OS细胞系中SIRT6的表达,观察其对U2OS细胞的作用。方法:设计合成SIRT6的si RNA序列,通过LipofectamineTM2000转染U2OS细胞系,通过蛋白质印迹法(Western blot)检测SIRT6蛋白的表达情况,利用流式细胞术检测细胞凋亡,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞增殖,Transwell法检测细胞侵袭和迁移能力,CCK-8法分析对紫杉醇的敏感性。结果:成功构建SIRT6 si RNA序列,Western blot检测转染后24、48和72 h的蛋白水平,实验组较对照组明显降低。流式细胞术检测细胞凋亡也显示实验组凋亡增加(P(0.05)。Transwell法检测结果显示,实验组侵袭与迁移能力较对照组下降(P(0.05)。CCK-8法检测细胞生长情况,可见经紫杉醇处理后实验组生长较对照组下降明显,差异有统计学意义(P(0.05)。结论:下调骨肉瘤U2OS细胞中SIRT6的表达可以抑制骨肉瘤细胞侵袭,促进凋亡,并增强骨肉瘤细胞对紫杉醇的化疗敏感性。

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第一作者:
第一作者单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科
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