目的探讨花生四烯酸对TNF-α/放线菌素D（Act D）诱导内皮细胞凋亡的影响及作用机制。方法将体外培养的人脐静脉内皮细胞随机分成空白组、模型组、环氧二十碳四烯酸（EET）组及EET+3-甲基腺嘌呤（3MA）组。空白组常规培养;后三组均加入TNF-α（10 ng/m L）和放线菌素D（Act D,5 ng/m L）诱导凋亡,EET组同时加入14,15-EET（100 nmol/L）,EET+3MA组同时加入14,15-EET（100 nmol/L）、3MA（2 mmol/L）。各组培养24 h时采用流式细胞仪检测细胞凋亡率;采用Western blotting法检测微管相关蛋白轻链3-Ⅰ（LC3-Ⅰ）及微管相关蛋白轻链3-Ⅱ（LC3-Ⅱ）,计算LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ;采用ELISA法检测Caspase-8、Caspase-9活性。结果空白组、EET组及EET+3MA组细胞凋亡率均较模型组减少（P均(0.01）,EET+3MA组细胞凋亡率较EET组增加（P(0.05）。EET组及EET+3MA组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ较模型组、空白组增加（P(0.05或(0.01）;EET+3MA组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ较EET组降低（P(0.01）。模型组、EET组、EET+3MA组Caspase-8、Caspase-9活性均较空白组升高,模型组均较EET+3MA组、EET组升高,EET+3MA组较EET组升高,组间比较P(0.05或(0.01。结论花生四烯酸可抑制TNF-α/Act D诱导的内皮细胞凋亡;通过抑制Caspase-8、Caspase-9活性诱导自噬可能是其作用机制。