摘要:
目的:研究赖氨酰氧化酶(LOX)对食管成纤维细胞参与瘢痕形成的影响。方法:选取食管癌术后患者吻合口狭窄处的活检组织,利用原代细胞培养技术制备原代食管成纤维细胞,并用细胞免疫化学鉴定。针对人LOX基因序列设计并合成siRNA,转染原代食管成纤维细胞;采用实时荧光定量PCR法和Western Blot法验证siRNA-LOX对LOX沉默效果,及其对基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)和纤维粘连蛋白(FN)的影响;细胞划痕实验评价沉默LOX表达对食管成纤维细胞迁移能力的影响。结果:原代食管成纤维细胞培养成功,且细胞抗波形蛋白免疫荧光阳性。siRNA-LOX转染成纤维细胞后48 h后,LOX mRNA和LOX蛋白表达水平显著下调(P(0.05),且在mRNA和蛋白水平明显抑制了MMP2、MMP9和FN的表达(P(0.05),并抑制了食管成纤维细胞的迁移能力(P(0.05)。结论:沉默LOX表达有潜力抑制食管成纤维细胞所致的瘢痕形成。