摘要：
目的 从铜死亡及其关键调控因子铁氧还原蛋白(FDX1)表达探讨乳脂球表皮生长因子8(MFG-E8)减轻肺移植缺血再灌注损伤的机制.方法 健康雄性SD大鼠50只,随机分为移植组、对照组和MFG-E8组,改良袖套法建立大鼠左肺移植模型.MFG-E8组受体大鼠术前30 min经尾静脉注射rhMFG-E8 20 μg/kg,对照组和移植组受体鼠尾静脉注射同等量生理盐水.肺移植再灌注3 h后阻断右肺门5 min,全自动血气分析检测仪检测动脉血中氧分压(PaO2)和二氧化碳分压(PaCO2).苏木精-伊红(HE)染色观察移植肺组织显微病理改变,组织髓过氧化物酶(MPO)试剂盒检测移植肺MPO活力,原位末端标记(TUNEL)法检测肺细胞凋亡,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测肺组织铜蓝蛋白(CER)和铜死亡相关蛋白FDX1表达.组间比较使用t检验,多组比较采取单因素方差分析.结果 再灌注3 h后,HE染色可见移植组肺泡结构破坏明显、肺水肿伴大量炎性细胞浸润;MFG-E8组肺泡结构基本完整,炎性反应明显减轻,仅少量炎性细胞浸润.再灌注3 h后,MFG-E8组动脉PaO2/FiO2显著高于移植组[(264.65±47.23)mmHg 比(208.36±32.45)mmHg,1 mmHg=0.133 kPa,t=3.106,P＜0.05],肺组织MPO活力和细胞凋亡指数均明显低于移植组[(0.75±0.13)U/g prot 比(0.98±0.17)U/g prot,t=3.399,P＜0.05;(25.21±5.68)％比(34.16±4.75)％,t=3.822,P＜0.05].移植组大鼠肺组织FDX1蛋白水平表达明显高于对照组(0.52±0.18比0.29±0.14,t=3.190,P＜0.05);MFG-E8组大鼠肺组织FDX1蛋白水平表达显著低于移植组(0.37±0.12比0.52±0.18,t=2.193,P＜0.05);移植组大鼠肺组织CER蛋白水平表达低于对照组(0.26±0.11比0.32±0.14,t=1.066,P＞0.05),但差异无统计学意义;MFG-E8组大鼠肺组织CER蛋白水平高于移植组(0.33±0.15比0.26±0.11,t=1.190,P＞0.05),但差异无统计学意义.结论 MFG-E8可能通过抑制氧化应激和铜死亡相关蛋白FDX1表达发挥抗肺移植缺血再灌注损伤作用.
