摘要：
目的 探讨微小核糖核酸(RNA)-221(miR-221)对结肠癌细胞侵袭转移能力的影响及其分子机制.方法 以人结肠癌SW48细胞作为研究对象,设置高表达对照组(miR-NC组),高表达miR-221组(miR-221组),低表达对照组(lnh-NC组),低表达miR-221组(lnh-221组),通过增加或降低miR-221表达,采用细胞迁移及侵袭试验(Transwell实验),检测miR-221对结肠癌细胞侵袭转移能力的影响;通过使用蛋白质印迹法(Western blot)检测miR-221对Brahma相关基因-1(BRG1)表达的影响.通过荧光素酶报告基因(Luciferase)实验,检测miR-221在SW48细胞中对BRG1转录活性的影响.通过在miR-221高表达的SW48细胞中高表达BRG1,检测BRG1在miR-221调控结肠癌细胞侵袭转移中的作用.组间比较采用t检验.结果 在SW48细胞中,迁移和侵袭实验结果显示,miR-221组细胞的迁移和侵袭能力高于miR-NC组(迁移,miR-NC 110.30±7.79 比 miR-221 193.00±4.73,t=9.071,P＜0.01;侵袭,miR-NC 62.67±8.45 比 miR-221 122.00±21.17,t=2.603,P＜0.01);与lnh-NC组比较,lnh-221组细胞的迁移和侵袭能力低于lnh-NC组(迁移,lnh-NC 104.70±11.29 比 lnh-221 73.67±6.12,t=2.410,P＜0.01;侵袭,lnh-NC 55.67±8.11 比lnh-221 32.67±4.05,t=2.545,P＜0.01).在结肠癌LoVo细胞和SW48细胞中分别高表达和低表达miR-221,Western blot结果显示miR-221高表达可以使BRG1表达量降低,miR-221低表达可以使BRG1表达量升高.Luciferase实验中,miR-221高表达组BRG1 mRNA的转录活性低于miR-NC组(miR-NC 1.10±0.08 比 miR-221 0.62±0.05,t=4.862,P＜0.01),这提示 miR-221 可能直接与BRG1 mRNA3'端非编码区(3'UTR)结合,发挥对BRG1的调控作用.在迁移和侵袭实验中,同时高表达miR-221和BRG1组(miR-221/Ad-BRG1组)细胞迁移和侵袭能力低于高表达miR-221组(miR-221/Ad-GFP 组)(迁移,miR-221/Ad-GFP 163.30±9.39 比 miR-221/Ad-BRG1 27.33±2.33,t=14.063,P＜0.01;侵袭,miR-221/Ad-GFP 75.33±8.19 比 miR-221/Ad-BRG1 11.67±1.33,t=7.674,P＜0.01),这提示高表达BRG1可减弱miR-221促进结肠癌细胞侵袭转移的能力.结论 miR-221可促进结肠癌细胞侵袭转移,这种作用的发挥可能部分依赖于BRG1.
