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华中科技大学同济医学院附属同济医院
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摘要：
本发明公开了一种卵巢细胞外基质支架和水凝胶及其制备方法与应用，属于生物医学和临床医学技术领域。其中，卵巢细胞外基质支架的制备方法为1)卵巢组织的预处理；2)多重脱细胞处理：取步骤1)处理好的卵巢组织皮、髓质依次置于双蒸水、脱氧胆酸钠与曲那通X‑100混合液、十二烷基硫酸钠溶液中充分震荡洗涤，然后添加DNA酶置于温度为37℃的培养基中培养4～8h；3)灭菌及冻干处理：4)制备卵巢细胞外基质支架：取步骤3)制备的冻干组织研磨成粒径＜1mm的颗粒物，向颗粒物中加入酸液、胃蛋白酶、碱液及缓冲溶液，制得卵巢细胞外基质支架。继续向卵巢细胞外基质支架内加入颗粒细胞及卵泡即制得可植入哺乳动物体内且起到修复卵巢损伤及重建卵巢功能作用的水凝胶材料。该项研究为女性生育力保护提供了新策略。
主权项：
1.一种卵巢细胞外基质支架，其特征在于，它由如下制备方法制得：1）卵巢组织的预处理：去除哺乳动物卵巢周围的脂肪组织，分离出卵巢组织皮、髓质，并释放卵泡液，具体的将哺乳动物卵巢门部呈蝶形剪开，分离出卵巢组织皮、髓质，并控制所述卵巢组织皮厚度为0.5~2mm；2）多重脱细胞处理：取步骤1）处理好的卵巢组织皮、髓质依次置于双蒸水、脱氧胆酸钠与曲那通X-100混合液、十二烷基硫酸钠溶液中充分震荡洗涤，其中，在上述各液体中分别震荡洗涤2~6次，且每次洗涤均需更换新的洗涤液，且在双蒸水、脱氧胆酸钠洗涤之间还进行-80℃冰箱中过夜处理操作；最后添加DNA酶置于温度为37℃的培养基中培养4~8h；3）灭菌及冻干处理：4）制备卵巢细胞外基质支架：取步骤3）制备的冻干组织研磨成粒径＜1mm的颗粒物，向所述颗粒物中加入酸液、胃蛋白酶、碱液及缓冲溶液，制得卵巢细胞外基质支架。
