摘要:
目的检测程序化细胞死亡分子5(programmed cell death 5,PDCD5)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase 3)在不同年龄段C57BL/6J小鼠耳蜗中的表达,初步探讨其在年龄相关性听力下降发生、发展中的作用。方法选择3、6、9及12月龄段C57BL/6J小鼠各15只,即按月龄分为四组。检测各组小鼠双侧短声(click)及短纯音(6、8 kHz)听眭脑干反应(ABR)阈值。采用免疫组化和蛋白质印迹杂交(Western blotting)检测各月龄段小鼠耳蜗PDCD5和Caspase 3蛋白的表达,实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测各月龄段小鼠耳蜗PDCD5和caspase 3基因mRNA的表达。结果随着年龄的增长,C57BL/6J小鼠各频率ABR阈值逐渐提高,耳蜗PDCD5和Caspase 3蛋白的表达亦逐渐增强。3月龄和6月龄小鼠耳蜗毛细胞和血管纹细胞仅出现少量PDCD5和Caspase 3蛋白表达,9月龄时表达有明显增加,至12月龄时表达最强,各月龄组间比较,差异具有统计学意义(P值均(0.05)。Real-time PCR检测显示PDCD5和caspase 3基因mRNA随着年龄的增长表达逐渐增强,与其蛋白变化趋势相一致。结论 C57BL/6J小鼠耳蜗PDCD5和caspase 3随着年龄的增长表达增强,与耳蜗的老化密切相关,可能是老年性聋发病机制中的一个重要因素。