资源类型：
收录情况：
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-E
文章类型：
单位：
[1] 华中科技大学同济医学院附属同济医院耳鼻咽喉-头颈外科
华中科技大学同济医学院附属同济医院
耳鼻咽喉-头颈外科
[2] 浙江大学医学院附属第一医院耳鼻咽喉科
浙江大学医学院附属第一医院
[3] 湖北省老河口市妇幼保健院外科
出处：
ISSN：
关键词：
Math1
慢病毒
293T细胞
摘要：
目的构建携带Math1基因的重组慢病毒载体,检测其滴度,检测其在293T细胞中的表达。方法 PCR扩增Math1基因,将其连入慢病毒载体pLenti-GFP中;在感受态细胞DH5α中培养扩增,并行Math1基因的测序鉴定;将重组的慢病毒四质粒共转染293T细胞,收获并浓缩病毒;感染293T细胞和提取细胞DNA后用实时定量PCR法检测病毒滴度。用逆转录PCR和Western blot法检测Math1基因在感染病毒的293T细胞中的表达。结果构建的慢病毒载体pLenti-Math1-GFP经测序分析证实基因序列正确。四质粒共转染293T细胞后,荧光显微镜下可见大量绿色荧光。包装后慢病毒测定滴度约为3×1011Tu/L。逆转录PCR和Western blot法均能检测Math1基因在感染病毒的293T细胞中的表达。结论成功构建携带Math1基因的重组慢病毒,并能在293T细胞中表达。
基金：
国家自然科学基金课题(81070782)%浙江省自然科学基金课题(Y2080334)%浙江省医药卫生科学研究基金课题(2008A056)
第一作者：
第一作者单位：
[1] 华中科技大学同济医学院附属同济医院耳鼻咽喉-头颈外科
推荐引用方式(GB/T 7714)：
潘松,付勇,刘强,等.Math1基因重组慢病毒的构建及其在293T细胞中的表达[J].中国现代医学杂志.2011,21(04):412-417.
