摘要:
目的了解HBV及其抗原成分对干扰素(IFN)αJanus激酶-信号传导和转录激活子(JAK-STAT)信号传导途径分子和抗病毒蛋白表达可能存在的影响。方法以人肝胚瘤细胞株HepG2细胞为研究对象,分别经质粒转染(以能够表达完整HBV病毒颗粒或HBsAg、HBcAg的质粒pSM2、pHBS2-S和pHBc EGFP)、病毒感染(以HepG2.2.15细胞培养上清液感染HepG2细胞,其含有完整HBV病毒颗粒和HBV抗原)以及与HBV抗原直接接触刺激等方式处理不同组HepG2细胞,以Northern blot和RT PCR等方法分析各处理组HepG2细胞的IFNα应答情况,如检测抗病毒蛋白[如粘病毒抵抗蛋白A(MxA)、2’-5’寡腺苷酸合成酶(2’-5’OAS)、9-27等】和JAK-STAT信号传导途径分子(如STATl)的表达。对数据进行t检验。结果转染psM2、pHBS2-S和pHBc-EGFP质粒后,HepG2细胞能够表达完整的HBV颗粒或HBV抗原,且随着转染时间的延长,HBV颗粒或抗原表达量逐步增多,转染48、96 h的细胞培养上清液中HBsAg的S/CO值为0.81±0.11和2.35±0.33(t=10.84,P(0.05),HBeAg的S/CO值为0.69±0.06和1.79±0.13(t=18.82,P(0.05)。Northern blot分析提示HepG2细胞能够表达IFNα抗病毒蛋白MxA、2’,5’,OAS、9-27等,但质粒转染、病毒感染和HBV抗原直接接触刺激的HepG2细胞,IFNα抗病毒蛋白MxA、2’,5’,OAS、9 27等的表达量明显减低,且随着转染时间的延长而进一步减低;此外,STAT1的表达也随着HBV颗粒或HBV抗原的表达而受到抑制。结论在体外细胞模型中,HBV及其抗原成分影响IFNαJAK-STAT信号传导途径分子和抗病毒蛋白的表达;HBV具有拮抗或反作用于IFNα抗病毒活性的机制。