摘要:
目的探讨Toll样受体信号转导分子髓样分化因子88(MyD88)抑制剂ST2825对巨噬细胞系RAW264.7细胞生物学活性的影响,为新型免疫抑制剂的研发提供新的思路。方法培养RAW264.7细胞并分为4组:空白对照组细胞不给予任何处理和刺激;脂多糖对照组细胞给予脂多糖(500ng/mL)刺激;ST2825低浓度组和高浓度组细胞分别给予浓度为10μmol/L和20μmol/L的ST2825预处理1h后再给予脂多糖刺激。36h后收集细胞,流式细胞术检测细胞表面共刺激分子CD80和CD86的表达;提取细胞RNA,实时荧光定量PCR检测IL-1、IL-6、TNF-αmRNA水平。异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC-Dextran)法测定细胞吞噬功能。结果脂多糖对照组RAW264.7细胞共刺激分子CD80和CD86表达率分别为(54.2±1.6)%和(56.8±2.9)%,与空白对照组相比均明显升高(均P(0.05);ST2825低浓度组和高浓度组CD80表达率分别为(37.4±1.7)%和(26.4±1.2)%,CD86表达率分别为(43.4±2.0)%和(31.5±1.1)%,与脂多糖对照组相比均降低(均P(0.05)。经脂多糖刺激后,脂多糖对照组RAW264.7细胞IL-1、IL-6和TNF-αmRNA表达水平升高,ST2825可降低上述促炎性细胞因子的mRNA表达水平。ST2825低浓度组和高浓度组细胞吞噬FITC-Dextran的能力与正常RAW264.7细胞无差异。结论 MyD88抑制剂ST2825可抑制脂多糖对天然免疫细胞的免疫活化效应,而不影响细胞的吞噬功能,为ST2825作为免疫抑制剂用于临床奠定了实验基础。