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微泡造影剂结合超声介导一氧化氮合成酶基因转染血管平滑肌细胞

Transfection of Nitric Oxide Synthase Gene into Vascular Smooth Muscle Cells Mediated by Ultrasound Combined with Microbubble Contrast Agent

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C

单位: [1] 华中科技大学同济医学院附属同济医院心胸外科 [2] 华中科技大学同济医学院附属协和医院心脏外科 [3] 华中科技大学同济医学院附属协和医院超声影像科
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关键词: 超声造影剂 微泡 一氧气化氮合成酶基因 血管平滑肌细胞

摘要:
目的探讨微泡造影剂及超声辐照介导内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)基因转染体外培养大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)的可行性。方法实验分为A、B、C、D、E 5组,分别为空白对照组、单纯质粒浸泡组、质粒+微泡造影剂组、质粒+超声辐照组、质粒+超声辐照+造影剂组。用重组真核表达载体pcDNA3.1-eNOS经微泡造影剂及超声辐照介导转染体外培养的大鼠VSMCs,辐照条件为超声探头频率为10MHz,机械指数为1.9,辐照时间为10min,重组真核细胞表达载体pcDNA3.1-eNOS 5μg/mL。辐照48h后,采用RT-PCR、Western blot及免疫组化检测VSMCs内eNOSmRNA和蛋白的表达。结果 RT-PCR检测E组eNOS mRNA的表达最显著,积分吸光度(IA)比值为(91.11±3.41)%,B、C、D组也有少量表达,IA比值分别为(26.10±1.32)%、(31.42±2.43)%、(35.05±2.25)%,与E组相比均P(0.05。蛋白印迹分析eNOS蛋白表达,A组有极少量表达,B、C、D组也有少量表达,IA比值分别为(22.12±1.33)%、(25.42±2.41)%、(33.11±3.11)%,而E组表达最明显,IA比值为(84.22±9.22)%,与各组相比均P(0.05。结论超声辐照结合微泡造影剂能显著提高eNOS基因在VSMCs的转染效率,提高细胞内一氧化氮合成酶的表达。

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第一作者:
第一作者单位: [1] 华中科技大学同济医学院附属同济医院心胸外科
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