摘要:
目的 通过上调或下调肿瘤细胞内hnRNP G、hnRNP I、hTra2-beta1的表达,探索细胞内三种剪接因子对内源性ERa△7形成的作用.方法 Real-Time PCR和Western blot筛选ERα阳性表达细胞株,对细胞株转染hnRNP G、hnRNP I、hTra2-beta1表达质粒和shRNA干扰质粒以上调或下调三种剪接因子的表达,Real-time PCR检测ERa△7和ERα exon7的表达量.结果 筛选出MCF-7为ERα阳性表达细胞株.在hnRNP G表达上调组中,ERα△7和ERα exon7的相对表达量与上调空载体对照组存在统计学差异(P<0.05,P<0.05),在hnRNP G表达下调组中,ERα△7和ERα exon7的相对表达量与下调空载体对照组显著差异(P<0.05,P<0.05);在hnRNP I表达上调组中,ERα exon7的相对表达量与上调空载体对照纽显著差异(P<0.05);在hTra2-beta1表达上调组中,ERα△7和ERα exon7的相对表达量与上调空载体对照组显著差异(P<0.05,P<0.05),在hTra2-beta1表达下调组中,ERα△7和ERα exon7的相对表达量与下调空载体对照组显著差异(P<0.05,P<0.05),其中hnRNP G和hTra2-beta1对ERα7号外显子的作用为相反趋势.结论 hnRNP G和hTra2-beta1这两种蛋白可能在ERα exon7的选择性剪接方面存在相互拮抗的作用,hnRNP I对于ERα exon7的纳入存在拮抗作用,据此推测hnRNP G和hnRNP I在ERαexon7的选择性剪接存在协同作用.