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退行性骨关节炎软骨细胞差异表达蛋白及功能的研究

Differential proteomic analysis and function study of osteoarthritic chondrocytes

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-E ◇ 中华系列

单位: [1]200940,上海市第一人民医院宝山分院骨科 [2]武汉华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科
出处:
ISSN:

关键词: 骨关节炎 软骨细胞 蛋白质组学 RNA干扰 高迁移率族蛋白1

摘要:
目的 分析骨关节炎(OA)与正常人关节软骨细胞差异表达蛋白质图谱,筛选与OA相关的蛋白质并探讨其功能.方法 培养OA和正常人关节软骨细胞(OAC和NAC),蛋白质组学比较和筛选OAC和NAC蛋白质表达的差异.构建高迁移率族蛋白1(HMGB1) RNA干扰的真核表达载体Pgenesil-1/HMGB1小干扰RNA(siRNA)转染至OAC中,酶联免疫吸附法(ELISA法)检测转染后OAC上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达.结果 体外培养OAC和NAC呈多角形或梭形,甲苯胺蓝染色出现紫色异染颗粒.蛋白质组学研究获得6个在OAC中表达上调的蛋白,分别参与细胞骨架构成、转录调控、胶原合成和物质代谢等过程.成功构建siRNA表达载体Pgenesil-1/HMGB1 siRNA,转染OAC后高迁移率族蛋白1(HMGB1)蛋白含量(0.14±0.03)明显低于对照组(Pgenesil-1/OAC:0.52±0.04,P<0.05)和空白组(OAC:0.49±0.07,P<0.05),Pgenesil-1/HMGB1 siRNA/OAC上清液中IL-1β和TNF-α[(25.23±11.39)、(287.36±118.36) ng/L]明显低于Pgenesil-1/OAC[(63.23±5.38)、(655.00±49.27) ng/L]和OAC[(69.71±6.76)、(591.94±75.89) ng/L],差异有统计学意义(P<0.05).结论 HMGB1与OA密切相关,下调HMGB1基因,能够明显抑制软骨细胞IL-1β和TNF-α的表达.

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第一作者:
第一作者单位: [1]200940,上海市第一人民医院宝山分院骨科
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