摘要:
目的探讨在细胞毒药物奥沙利铂诱导下,人骨髓CD34+前体造血细胞与CD34-成熟造血细胞发生细胞凋亡及DNA损伤修复信号通路上相关基因表达的情况。方法采用免疫磁珠法分选出16例人骨髓单个核细胞中的CD34+及CD34-细胞,并应用流式细胞术检测其纯度。用奥沙利铂(终末浓度为10μg/mL)诱导2种细胞凋亡,检测诱导不同时间的2种细胞凋亡率的差异。提取细胞RNA,并利用基因芯片技术,分析比较药物诱导前后的CD34+及CD34-细胞中DNA损伤修复信号通路相关基因的表达情况。结果16份骨髓样本CD34+阳性率为(4.75±1.82)%;免疫磁珠法分选后,流式细胞术检测CD34+细胞的纯度为(81.24±5.68)%,所得CD34-细胞的纯度为(97.67±1.21)%。CD34+细胞在经过奥沙利铂诱导后4、8、12h,凋亡率分别为(27.44±4.12)%、(53.58±7.89)%,(84.65±6.20)%,CD34-细胞在诱导后4、8、12h,凋亡率分别为(18.40±3.07)%、(39.11±5.28)%、(71.65±7.73)%,各时间点2种细胞的凋亡率差异均有统计学意义(均P(0.05)。基因芯片结果显示,在加入奥沙利铂诱导前,CD34+细胞与CD34-细胞表达差异2倍以上的基因有9种,其中前者有7种基因表达高于后者,2种基因表达低于后者,在奥沙利铂诱导8h后,CD34+细胞与CD34-细胞表达差异2倍以上的基因有14种,均为前者高于后者。结论在奥沙利铂诱导下,骨髓前体CD34+细胞和成熟的CD34-细胞相比,其DNA损伤修复系统相关基因表达水平较高,但更易于发生细胞凋亡。