资源类型:
期刊
收录情况:
◇ 北大核心
◇ CSCD-E
◇ 中华系列
文章类型:
单位:
[1]同济大学附属同济医院骨科,上海,200065
出处:
中华实验外科杂志.2016,33(1):158-162.
ISSN:
1001-9030
关键词:
RNA干扰
葡萄糖转运蛋白-1
骨肉瘤
增殖
侵袭
成瘤性
摘要:
目的 利用RNA干扰(RNAi)技术抑制骨肉瘤MG63细胞中葡萄糖转运蛋白(Glut-1)表达,观察对MG63细胞在体内外功能的影响.方法 克隆Glut-1基因,通过慢病毒感染293T细胞,构建成干扰、原始及对照组的3种慢病毒载体后分别转染到人骨肉瘤MG63细胞,形成干扰、原始及对照3个稳转细胞株.应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术鉴定细胞RNAi后Glut-1mRNA的表达.噻唑蓝(MTT)检测RNAi后细胞增殖的改变;根据人工基底膜的细胞穿过数量检测RNAi后细胞侵袭功能改变;流式细胞术检测RNAi后细胞周期的改变.利用异种移植瘤模型观察Glut-1干扰后对肿瘤生长的影响.结果 RNAi成功后,Glut-1的mRNA水平明显降低(P<0.05).干扰组细胞吸光度值的均值较原始组及对照组明显降低(P<0.05);细胞侵袭实验显示干扰组细胞穿过人工基底膜的数量明显减少(P<0.05);细胞周期中干扰组细胞G1相61.77%被阻断.裸鼠皮下成瘤实验表明,抑制Glut-1的表达可抑制肿瘤的生长.结论 RNAi抑制MG63细胞Glut-1的表达,可通过糖代谢过程来发挥肿瘤抑制作用.
基金:
Natural Science Foundation of Shanghai(14ZR1437800)%Shanghai Municipal Bureau of Health (20134328)上海市自然基金面上项目(14ZR1437800)%上海市卫生与计划生育委员会基金面上项目(20134328)
第一作者:
樊健
第一作者单位:
[1]同济大学附属同济医院骨科,上海,200065
推荐引用方式(GB/T 7714):
樊健,袁锋,李山珠,等.抑制葡萄糖转运蛋白1表达对骨肉瘤MG63细胞体内外功能的影响[J].中华实验外科杂志.2016,33(1):158-162.