摘要:
目的研究化疗药物顺铂(cisplatin)诱导神经母细胞瘤细胞衰老及作用机制,探讨其是否能够通过诱导细胞衰老而抑制肿瘤生长。方法以N-MYC扩增的神经母细胞瘤细胞系(IMR32)为研究对象,噻唑蓝比色法(MTT)和流式细胞术检测不同浓度的顺铂(0.5、1、2、5μmol/L)对细胞生长和细胞周期、凋亡的影响。利用2μmol/L顺铂处理细胞48h后,采用衰老相关-β-半乳糖苷酶(senescence associated-β-galactosidase,SA-β-gal)染色方法检测细胞衰老情况。利用蛋白质免疫印迹(Western blot)方法检测衰老细胞内N-MYC蛋白的表达情况。结果 MTT和流式细胞术结果显示顺铂(2μmol/L)在短时间作用下可抑制肿瘤细胞增殖而不出现明显凋亡。顺铂(2μmol/L)处理IMR32细胞48h后进行SA-β-gal细胞染色,可见加药处理后细胞呈现蓝色,说明顺铂能够诱导神经母细胞瘤细胞出现衰老。收集顺铂(2μmol/L)作用不同时间段的细胞,利用Western blot分析N-MYC蛋白水平表达,结果显示顺铂处理后的衰老细胞中NMYC蛋白表达下调。结论顺铂可通过下调N-MYC蛋白表达,诱导神经母细胞瘤细胞衰老,进而抑制肿瘤生长。