目的：明确Zn2+交联的海藻酸钠水凝胶（AH）三维支架的理化特性、超微结构、管道结构的稳定性；评价AH与脊髓神经干/祖细胞（NSPCs）的生物相容性。方法：采用Zn2+与海藻酸钠交联制备AH三维支架；光镜和扫描电镜评估其微管道结构；光谱分析仪测定盐酸洗涤后水凝胶内部残留Zn2+含量；分离和培养胎鼠（E14）脊髓NSPCs；细胞培养环境下用磷酸盐缓冲液孵育AH三维支架18周，光镜下观察内部管道变化情况，测量重量变化；脊髓NSPCs与AH三维支架共培养，MTT法测定细胞存活率，免疫荧光染色检测NSPCs的分化。结果：AH三维支架管道直径为（93.26±6.24）μm，管道密度为（9.72±2.37）/mm2，管道孔隙率为（66.22±8.97）%；经过盐酸洗涤8次后，AH三维支架内Zn2+浓度为0.08 nmoL/mg；脊髓NSPCs在AH三维支架表面的存活率＞90%，且可以分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。结论：AH三维支架仅含有极低浓度的Zn2+，且具有稳定的拓扑结构，与脊髓NSPCs有良好的生物相容性。